Differenza principale tra immunoprecipitazione e coimmunoprecipitazione è che l’immunoprecipitazione è una tecnica che precipita le proteine dalla soluzione utilizzando anticorpi specifici, mentre la coimmunoprecipitazione è una tecnica che precipita complessi proteici intatti da soluzioni utilizzando anticorpi specifici.
Le interazioni antigene-anticorpo sono interazioni chimiche specifiche tra gli anticorpi prodotti dai linfociti B e gli antigeni (proteine) durante una reazione immunitaria. Normalmente, l’antigene solubile si combina con l’anticorpo disciolto in presenza dell’elettrolita alla temperatura e al pH disciolti per creare un complesso visibile insolubile. Questa è chiamata reazione di precipitazione. Pertanto, l’immunoprecipitazione e la coimmunoprecipitazione sono due tipi di reazioni di precipitazione che vengono abitualmente utilizzate nei laboratori per identificare proteine simili all’antigene.
CONTENUTI
1. Panoramica e differenze chiave
2. Che cos’è l’immunoprecipitazione?
3. Che cos’è la coimmunoprecipitazione?
4. Somiglianze – Immunoprecipitazione e Coimmunoprecipitazione
5. Immunoprecipitazione vs Coimmunoprecipitazione in forma tabulare
6. Riepilogo – Immunoprecipitazione vs Coimmunoprecipitazione
Che cos’è l’immunoprecipitazione?
L’immunoprecipitazione è una tecnica di deposizione di proteine da una soluzione che utilizza anticorpi specifici. A volte, questa tecnica è anche nota come immunoprecipitazione proteica individuale. L’immunoprecipitazione utilizza gli anticorpi per isolare una particolare proteina di interesse dai lisati cellulari. Gli anticorpi purificano le proteine oi loro specifici antigeni bersaglio da una miscela. L’anticorpo si lega alla proteina e il complesso anticorpo-antigene viene prelevato dal campione. Nell’ambiente sperimentale, i complessi antigene-anticorpo vengono estratti utilizzando agarosio proteina A/G o sfere magnetiche. Quindi, le perline vengono lavate e la proteina desiderata viene eluita. La proteina o l’antigene purificato ottenuto mediante immunoprecipitazione è stato verificato mediante varie tecniche come il test di immunoassorbimento enzimatico (ELISA) e il western blot (WB).
Figura 01: Immunoprecipitazione
Inoltre, la proteina o l’antigene isolato possono essere misurati e identificati mediante spettrometria di massa utilizzando il pattern di digestione enzimatica basato sulla sequenza di primer. Ci sono alcune considerazioni prima di iniziare un esperimento di immunoprecipitazione: selezione del formato del metodo, legame di proteine e perline, selezione di anticorpi primari e isotipi appropriati e controllo negativo.
Che cos’è la coimmunoprecipitazione?
La coimmunoprecipitazione è una tecnica di deposizione di complessi proteici interi dalla soluzione utilizzando anticorpi specifici. La coimmunoprecipitazione generalmente funziona selezionando anticorpi specifici che prendono di mira proteine note (antigeni) ritenute membri di complessi proteici più grandi. Mirando ai membri noti con anticorpi specifici, è possibile estrarre l’intero complesso proteico dalla soluzione. Ciò consente l’identificazione di membri complessi sconosciuti. Il concetto di estrarre i complessi proteici dalla soluzione viene talvolta definito meccanismo di “abbassamento”.
Figura 02: B coimmunoprecipitazione
La coimmunoprecipitazione è una potente tecnica utilizzata per analizzare le interazioni proteina-proteina. L’obiettivo principale della coimmunoprecipitazione è l’identificazione di partner interagenti come ligandi, cofattori o molecole di segnalazione alla proteina di interesse. Inoltre, la coimmunoprecipitazione è una tecnica efficace utilizzata per separare le proteine da siero, lisati cellulari, tessuti omogeneizzati o mezzi condizionati.
Quali sono le somiglianze tra immunoprecipitazione e coimmunoprecipitazione?
- L’immunoprecipitazione e la coimmunoprecipitazione sono due tipi di tecniche basate sulla reazione di precipitazione.
- Entrambe le tecniche possono essere utilizzate per identificare antigeni bersaglio attraverso anticorpi specifici.
- Entrambe le tecniche si basano fortemente sulle interazioni antigene-anticorpo.
- Sono abitualmente utilizzati nei laboratori clinici.
Qual è la differenza tra immunoprecipitazione e coimmunoprecipitazione?
L’immunoprecipitazione è una tecnica che precipita le proteine fuori dalla soluzione usando anticorpi specifici, mentre la coimmunoprecipitazione è una tecnica che precipita i complessi proteici intatti dalla soluzione usando anticorpi specifici. Quindi, questa è la differenza chiave tra immunoprecipitazione e coimmunoprecipitazione. Inoltre, l’immunoprecipitazione è più comunemente usata in laboratorio, mentre la coimmunoprecipitazione non è comunemente usata in laboratorio.
Di seguito l’infografica presenta la differenza tra immunoprecipitazione e coimmunoprecipitazione in forma tabellare per il confronto affiancato.
Riepilogo – Immunoprecipitazione vs Coimmunoprecipitazione
L’immunoprecipitazione e la coimmunoprecipitazione sono due tipi di tecniche basate sulla reazione di precipitazione che dipendono dalle interazioni antigene-anticorpo. La tecnica di immunoprecipitazione fa precipitare le proteine fuori dalla soluzione utilizzando anticorpi specifici, mentre la tecnica di coimmunoprecipitazione precipita i complessi proteici intatti dalla soluzione utilizzando anticorpi specifici. Quindi, questo riassume la differenza tra immunoprecipitazione e coimmunoprecipitazione.
Riferimento:
1. “Panoramica delle tecniche di immunoprecipitazione (IP)..” Thermo Fisher Scientific – USA.
2. “Principi e metodi di co-immunoprecipitazione (Co-IP)..” Principi e metodi di co-immunoprecipitazione (Co-IP) | MBL Scienze della vita -ASIA-.
Immagini di cortesia:
1. “ImmunoprecipitazioneDi Itayba su Wikipedia in ebraico (CC BY-SA 3.0) tramite Commons Wikimedia
2. “20110113-Co-Imunoprecipitazione“Di Dtabb73 – Opera propria (CC0) tramite Commons Wikimedia
